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QUANTIFICATION Circulating DNA

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La cuantificación del ADN circulante se realiza idealmente mediante qPCR o electroforesis capilar, ya que los métodos comunes, como la medición de la absorción o la cuantificación basada en colorante fluorescente, pueden conducir a resultados falsos debido a la baja concentración del ADN circulante presente en los fluidos biológicos.

 

El ADN circulante total aislado se puede cuantificar utilizando la prueba Cell-free human DNA detc-qPCR Test diseñada para identificar una región de secuencia conservada de un gen repetido más de cien veces en el genoma humano.

 

Se presentan como microtubos listos para su uso conteniendo todos los componentes necesarios para desarrollar un ensayo de PCR cuantitativa.

Especificaciones:

Real-time PCR amplification plot para cfhDNA dtec-qPCR Test (rojo) que se dirige a un gen de copia múltiple “no truncado” y se compara con un blanco monocopia (azul), utilizando un ADN genómico humano como estándar. Debido a la presencia de múltiples copias del objetivo seleccionado, la sensibilidad aumenta en 2 registros (100 veces) para la prueba dtec-qPCR de cfhDNA. Se observa la misma señal aumentada para las muestras de ADN purificadas sin células empleadas para la cuantificación de ADN circulante.

Cuantificación de ADN circulante en plasmaQuantification

Se recogieron muestras de sangre de 8 pacientes (muestras 1 a 8) con cáncer de mama y controles sanos. Se usaron 2 muestras para individuos sanos (muestras 9 y 10) y 2 muestras de individuos sanos a las que se  añadieron 150 ng (muestra 11) y 300 ng (muestra 12) de ADN genómico humano.

 

El ADN circulante se aisló a partir de 3 ml de plasma siguiendo el protocol del DANAGENE Circulating DNA Kit y cuantificado utilizando el  Cell-free human DNA detc-qPCR Test.

 

Se ha detectado con éxito concentraciones aumentadas de ADN circulante en todos los pacientes con cáncer.

Referencia  Descripción Producto Preparaciones
cfhDNA-24 cfhDNA MONODOSE detc.qPCR Test 24
cfhDNA-96 cfhDNA MONODOSE detc.qPCR Test 96