ADN Genómico
BLOOD DNA
DANAGENE BLOOD DNA Kit
Este kit provee un método para la extracción de ADN genómico de alta calidad a partir de sangre total o médula ósea de mamífero.
Este kit está basado en un proceso simple y rápido de lisis y desproteinización sin utilizar reactivos tóxicos, disolventes orgánicos o tratamientos enzimáticos.
El ADN obtenido tiene una elevada pureza y puede ser utilizado en procedimientos como Southern Blot, PCR, análisis de RFLP,análisis de restricción, secuenciación y clonaje.
Características:
- Método rápido, NO TOXICO y económico.
- Método completamente escalable permitiendo procesar un amplio rango de muestras desde 100 µl hasta 10 ml.
- Rendimiento de 35 µg/ml con excelente calidad del ADN, A260/280 1.7- 1.9.
- Completado en 45-60 minutos.
Aplicaciones:
- Banco de ADN.
- PCR y PCR cuantitativa.
- Análisis de SNP .
- Southern Blotting.
- Secuenciación y NGS.
Procedimiento:
DANAGENE BLOOD DNA Kit
|
|
Ref.0601 | for 100 ml de sangre. |
Ref.0602 | for 200 ml de sangre. |
DANAGENE SPIN BLOOD DNA Kit
Este kit está designado para una rápida purificación de ADN genómico puro a parir de sangre total, suero, plasma, fluidos corporales y “spots” de sangre seca utilizando Microspin columnas con membrana de sílica a la cual se une selectivamente el ADN.
El kit utiliza un nuevo formulado Tampón de lisis/unión específico para la extracción de ADN a partir de muestras de sangre.
Características:
- Tecnología de membrana de sílica con Microcolumnas .
- Para una rápida purificación de ADN de elevada calidad a partir de sangre.
- Tamaño de muestras: 300 µl de sangre, suero, plasma, fluidos corporales y “spots· de sangre seca.
- Completa eliminación de contaminantes e inhibidores para las aplicaciones posteriores.
- Volumen de elución: 50-200 µl.
- Rendimiento típico: 6- 9 µg ADN
- El ADN obtenido puede ser utilizado directamente en PCR, Southern, reacciones enzimáticas, clonaje, etc.
Aplicaciones:
- ADN genómico, bacteriano y vírico.
- ADN a partir de sangre total (humana o animal, fresca o congelada).
- ADN a partir de sangre tratada con citrato, EDTA, heparina.
- ADN a partir de suero, plasma, fluidos corporales y “spots· de sangre seca.
Procedimiento:
La lisis se consigue por incubación de la sangre total en un tampón que contiene elevadas cantidades de iones caotrópicos en presencia de proteinasa K a 70ºC. Añadiendo etanol se generan las condiciones apropiadas para la unión del ADN a la membrana de sílica. Los conatminantes son eliminados mediante lavados con diferentes tampones. El ADN es finalmente eluído con un tampón indicado para ello.
DANAGENE SPIN BLOOD DNA Kit
|
|
Ref.0606.1 | Para 50 extracciones.Incluye Proteinasa K |
Ref.0606.2 | Para 250 extracciones.Incluye Proteinasa K |
Tissues and Cells DNA
DANAGENE Genomic DNA Kit
Este kit está designado para una eficiente y rápida extracción de ADN genómico de alta calidad a partir de una amplia variedad de muestras incluyendo: Cultivo de células, tejidos animales, cola de ratón, tejidos embebidos en parafina, bacterias Gram (-), (+), levaduras, Drosophila melanogaster, fluidos corporales (saliva, semen, plasma, orina, suero, etc…), pelos, «Blood stain»).
Características:
- Método rápido y económico.
- Método escalable ya que no utiliza columnas o membranas con protocolos adaptados para una mayor flexibilidad.
- Método seguro ya que elimina la necesidad completamente de utilizar reactivos tóxicos.
- Permite procesar diferentes muestras biológicas.
- Se obtiene un ADN de alta calidad con un A260/ 280 de 1.7- 1.9.
Aplicaciones:
- Banco de ADN.
- PCR y PCR cuantitativa.
- Análisis de SNP .
- Southern Blotting.
- Secuenciación y NGS.
Procedimiento:
El procedimiento incluye una lisis celular con un detergente aniónico que solubiliza los componentes celulares necesarios, el ARN contaminante puede ser eliminado con un tratamiento con RNasa. Las proteínas celulares son eliminadas mediante precipitación, lo que permite dejar el ADN genómico en solución. Finalmente, el ADN genómico es aislado por una precipitación con isopropanol.
DANAGENE Genomic DNA Kit
|
|
Ref.0603.1.RNase y Proteinase K incluidas. | Para 50 extracciones de 20 mg de tejido y cola de ratón/ 50 extracciones de 4 x 106 células en cultivo/ 50 ml cultivo bacteriano/ 100 ml cultivo de levaduras. |
Ref.0603.2.RNase y Proteinase K incluidas. | Para 200 extracciones de 20 mg de tejido y cola de ratón/ 200 extracciones de 4 x 106 células en cultivo/ 200 ml cultivo bacteriano/ 400 ml cultivo de levaduras. |
Ref.0603.3 | Para 200 extracciones de 20 mg de tejido y cola de ratón/ 200 extracciones de 4 x 106 células en cultivo/ 200 ml cultivo bacteriano/ 400 ml cultivo de levaduras. |
DANAGENE SPIN Genomic DNA Kit
Este kit está designado para una eficiente y rápida extracción de ADN genómico de alta calidad a partir
de una amplia variedad de muestras incluyendo sangre,células en cultivo, tejidos animales, colas de ratón, bacterias, levaduras, muestras clínicas (suero, plasma, heces, orina ) y muestras de forense, tejidos embebidos en parafina utilizando para ello MicroSpin columnas con membranas de fibra de vidrio que unen selectivamente el ADN.
Características:
- Tecnología de MicroSpin columnas con membranas de fibra de vidrio.
- Hasta 35 µg de ADN se pueden obtener.
- Tamaño de la muestra: 200-300 µl sangre total, 200 µl “buffy coat”; 25-50 mg de tejido; 104– 107 células; 0.2-0.5 cm cola de ratón (25-50 mg); 108 levaduras; 109 bacterias (Gram+ o Gram -); secciones de tejidos embebidos en parafina. Para el resto de muestras o aplicaciones especiales consultar con nuestro servicio técnico.
- El ADN obtenido es de elevada calidad y puede ser utilizado directamente en PCR, Southern, cualquier reacción enzimática, clonaje, etc.
Procedimiento:
El procedimiento incluye una lisis en proteinasa K y una solución caotrópica que a su vez creará las condiciones necesarias para que el ADN se una a la membrana de fibra de vidrio. Los contaminantes son eliminados por lavados con eficientes tampones de lavado y finalmente el ADN es eluído con un tampón de elución.
DANAGENE SPIN Genomic DNA Kit |
|
Ref.0605.1 |
Para 50 extracciones a partir de las muestras indicadas en las características. Incluye la proteinasa K. |
Ref.0605.2 | Para 250 extracciones a partir de las muestras indicadas en las características. Incluye la proteinasa K. |
Ref.0605.3 | Para 1000 extracciones a partir de las muestras indicadas en las características. Incluye la proteinasa K. |
DANAGENE MICROSPIN Kit
Este kit está designado para una eficiente extracción de ADN genómico y mitocondrial a partir de pequeñas muestras, tales como diferentes tejidos y células animales, muestras microdiseccionadas por laser, pequeñas cantidades de sangre utilizando una columnas con un diseño especial
Estas columnas especiales permiten volúmenes de elución tan pequeños como 10 microlitros.
MUESTRA | TAMAÑO |
Muestras de tejido | < 10 mg |
Células en cultivo | < 105 |
Muestras de sangre | < 100 µl |
Tejidos microdiseccionados por láser | UNA MUESTRA |
Tejido embebidos en parafina | < 10 mg |
Frotis bucales | UNO |
Características:
- Tecnología de membrana de sílica con Microcolumnas con un diseño especial.
- Rápida purificación de ADN de elevada calidad a partir de muestras de pequeño tamaño.
- Completa eliminación de contaminantes e inhibidores para las aplicaciones posteriores.
- Volumen de elución: 10-30 µl.
- El ADN obtenido puede ser utilizado directamente en PCR, Southern, reacciones enzimáticas, clonaje, etc.
Aplicaciones:
- ADN extraído a partir de tejidos (Tejidos humanos o de ratón, microdisecciones por laser).
- ADN extraído a partir de células (cultivos de células).
- ADN extraído a partir de muestras clínicas (muestras de sangre, biopsias ).
- ADN extraídas a partir de muestras forenses (spots de sangre, frotis bucales).
DANAGENE MICROSPIN DNA KIT |
|
Ref.0607.1 | Para 50 extracciones. Incluye la Proteinasa K |
Ref.0607.2 | Para 250 extracciones. Incluye la Proteinasa K |
PLANT DNA
DANAGENE Plant DNA Kit
Este kit provee un método para una eficiente y rápida extracción de ADN genómico a partir de tejidos y células de plantas y hongos.
Es conocido que las plantas contienen cantidades de diferentes sustancias (polisacáridos, polifenoles, etc) y que plantas del mismo género o géneros relacionados pueden presentar enormes variabilidades en sus composiciones bioquímicas, de esta forma, se hace difícil de disponer de un único método de extracción de ADN para todas las plantas.
Para solventar este problema y poder abarcar el mayor número de plantas posibles se utiliza una solución de PVP que es capaz de unir los polisacáridos y polifenoles que se liberan mediante la lisis celular y que poseen la capacidad de formar complejos con los ácidos nucleicos y degradarlos o hacer que preciten con ellos.
Caracteríticas:
- Método rápido, sencillo y económico.
- Método completamente escalable permitiendo procesar un amplio rango de muestras.
- Método seguro, ya que elimina completamente la necesidad de utilizar reactivos tóxicos.
- Contiene una solución de PVP que permite trabajar con aquellas plantas con un elevado contenido de polisacáridos o compuestos fenólicos.
- Se completa en unos 45-60 minutos.
- Se obtiene un ADN que permite ser utilizado para PCR, Southern blot, RFLP, secuenciación o clonaje.
Aplicaciones:
- Banco de ADN.
- PCR y PCR cuantitativa.
- Análisis de SNP .
- Southern Blotting.
- Secuenciación y NGS.
Procedimiento:
El procedimiento incluye una homogenización de la muestra en un Tampón de extracción y la Solución de PVP. La lisis se completa con la incubación en un Tampón de Lisis y RNasa a 37ºC durante 30 minutos.
Las proteínas celulares y restos celulares son eliminados mediante una Tampón de eliminación de proteínas, lo que permite dejar el ADN genómico en solución. Finalmente el ADN genómico es aislado por una precipitación con isopropanol.
DANAGENE Plant DNA Kit |
|
Ref.0604.1 Incluye RNasa | Para 50 extracciones a partir de 20-40 mg de planta o hongo. |
Ref.0604.2. Incluye RNasa | Para 200 extracciones a partir de 20-40 mg de planta o hongo. |
DANAGENE Spin Plant DNA Kit
Este kit proporciona un método eficiente y rápido para la extracción de ADN genómico de plantas y hongos utilizando MiniSpin columnas.
El kit incluye 2 optimizados tampones de lisis, basados en los métodos establecidos de CTAB y de SDS. Las plantas son muy heterogéneas y contienen diferentes metabolitos como polifenoles, polisacáridos o componentes ácidos, DANAGENE SPIN PLANT DNA Kit suministra 2 diferentes procedimientos de lisis para el óptimo procesamiento de diferentes muestras de plantas.
Además, también le suministramos una solución de PVP que une los polisacáridos y polifenoles.
Características:
- Tecnología de membrana de sílica que utiliza MiniSpin columnas.
- Se puede utilizar 2 tampones de lisis optimizados y la solución de PVP.
- Elevada pureza: A260/A280 =1.6 – 1.9.
Aplicaciones:
- Extracción de ADN genómico de plantas a partir: Tejido de plantas o de hongos fresco, congelado o liofilizado. Células de plantas.
- El ADN aislado está listo para las siguientes aplicaciones como PCR, PCR cuantitativa y genotipado.
Procedimiento:
Las muestras de plantas son primero rotas/homogenizadas y luego lisadas en un optimizado tampón que contiene sales caotrópicas, agentes desnaturalizantes y detergentes.
Se puede utilizar 2 optimizados tampones de lisis basados en los métodos establecidos de CTAB y SDS.
El lisado crudo es limpiado por centrifugación y el lisado limpio es mezclado después con el tampón de unión y procesado a través de una MiniSpin columna que contiene una membrana de sílica que permite la unión del ADN.
Los contaminantes e impurezas como sales, metabolitos y componentes celulares son eliminados son eliminados con un paso de lavado con 2 diferentes tampones de lavado.
ADN genómico de elevada pureza es luego eluido en un Tampón de elución. El ADN ya está listo para ser utilizado en diferentes aplicaciones.
REALPURE SPIN Plants and Fungi
|
|
Ref.0611.1 | Para 50 extracciones. Incluye Proteinsa K |
Ref.0611.2 | Para 50 extracciones. Incluye Proteinsa K |
SALIVA DNA
DANAGENE SALIVA KIT
Este kit está designado para una rápida y eficiente purificación de ADN genómico a partir de diferentes muestras de saliva incluyendo:
- Muestras de saliva.
- Muestras de células bucales con cepillos de espuma DANASALIVA Hisopos. Ref.0603.42
- Muestras de saliva conservadas con nuestro DANASALIVA Sample Collection Kit. Ref.0603.43
- Muestras de saliva conservadas con los kits de ORAGENE (DNA Genotek).
Características:
- El ADN a partir de saliva es equivalente al de sangre para aplicaciones posteriores.
- Método no-invasivo e indoloro mejorando el cuidado del paciente.
- Método económico, rápido y reproducible.
- Método seguro y elimina la necesidad de utilizar reactivos tóxicos.
Aplicaciones:
- Banco de ADN.
- PCR y PCR cuantitativa.
- Análisis de SNP .
- Southern Blotting.
- Secuenciación y NGS.
Procedimiento:
El procedimiento incluye una lisis celular con un detergente aniónico que solubiliza los componentes celulares necesarios, y proteinasa K y RNAsa. Las proteínas celulares son eliminadas mediante precipitación, lo que permite dejar el ADN genómico en solución. Finalmente, el ADN genómico es aislado por una precipitación con isopropanol.
*Validación del DANAGENE SALIVA DNA KIT en el ROCHE 454 TITANIUM Next-Generation Sequencing Platform fue realizada en el Centro de Investigación, Tecnología e Innovación (CITIUS) Universidad de Sevilla.
Cuantificación. Utilizando el Quant-iT Picogreen dsDNA Reagent from INVIROGEN.
Ensayo de la calidad de la librería. Correr una alicuota de 1 ml de la Librería de ADN en un Agilent Bioanalyzer High Sesitivity DNA chip.
Cuantificación de la librería por PCR quantitativa. KAPA Library Quantification Kit from Kapabiosystems.
El AND aislado con el DANAGENE SALIVA DNA KIT a partir de diferentes muestras de saliva tiene una excelente calidd para ser utilizado en NGS:
- AND de doble cadena
- DO260/280> 1.75
- Concentración > 10 ng/μl.
- Calidad Librería: fragmentos entre 1400 y 1800 pb.
- Cuantificación Librería: > 1 x 107 moléculas/μl.
DANAGENE SALIVA KIT |
|
Ref.0603.4 / 0603.41 | RNasa y Proteinasa K incluída. |
SISTEMAS DE RECOLECCIÓN Y PRESERVACIÓN DE LA SALIVA
Estos sistemas proporcionan un rápido y seguro todo en uno procedimiento para la recolección, estabilización y transporte de muestras de saliva a temperatura ambiente.
Características:
- Fácil recolección, transporte y procesamiento.
- Método No-invasivo e indoloro.
- Conserva la saliva durante 2 años a temperatura ambiente.
- La saliva es conservada y lista para ser enviada.
- Permite la posterior extracción de un ADN de excelente calidad e integridad.
DANAGEN-BIOTED ha desarrollado 2 sistemas específicos para este propósito:
1. DANASALIVA Sample Collection Kit. Ref.0603.43
Las muestras de saliva son recogidas escupiendo en el interior del embudo (1), el cual se ha ensamblado con el Tubo de Recolección (2). Después, de recoger 2 ml de saliva el contenido de la Solución Conservación Saliva (3) es añadido y mezclado con la saliva recogida.
El Tubo de Recolección (2) es enviado al laboratorio para la extracción y análisis del ADN con el DNAGENE SALIVA DNA KIT.
2. DANASALIVA Hisopos. Ref.0603.42
Hisopos de espuma individuales que permiten una recolección segura de células bucales.
De esta forma muestras de células bucales pueden ser obtenidas por personal no entrenado y se hace más fácil la colaboración de familiares en estudios genéticos. Los investigadores o donantes simplemente deslizan el hisopo por las mejillas con movimientos durante 30 segundos para recoger el mayor número de células bucales.
Después de la recolección, el hisopo es introducido en el container cilíndrico para un transporte seguro de la muestra al laboratorio para la extracción y análisis del ADN con el DNAGENE SALIVA DNA KIT.
El AND extraído está disponible para ser utilizado en PCR.
DANASALIVA SAMPLE COLLECTION KITS |
|
Ref.0603.43100 | 100 unidades DANASALIVA Sample Collection Kit |
Ref.0603.43500 | 500 unidades DANASALIVA Sample Collection Kit |
Ref.0603.431000 | 1000 unidades DANASALIVA Sample Collection Kit |
DANASALIVA SAMPLE PRESERVATION KITS |
|
Ref.0602.42100 | 100 unidades DANASALIVA Hisopos |
Ref.0602.42500 | 500 unidades DANASALIVA Hisopos |
Ref.0602.421000 | 1000 unidades DANASALIVA Hisopos |
Food-Stool DNA
DANAGENE SPIN FOOD-STOOL KIT
Este kit ha sido optimizado para una eficiente y rápida purificación de ADN a partir de heces frescas o congeladas, de varias muestras de alimentos (materias primas y alimentos procesados) y cantidades grandes (200 mg) de plantas.
Después de homogenizar las muestras, el ADN puede ser aislado con el Tampón de extracción, la mezcla de lisis es centrifugada para eliminar contaminantes y desechos residuales. El sobrenadante es mezclado con el Tampón de unión + proteinasa K, incubado a 70ºC durante 10 minutos y luego isopropanol para crear las condiciones apropiadas para una óptima unión del ADN a la membrana de sílica de la columna. Después de 2 lavados con tampones diferentes para una eficiente eliminación de los potenciales inhibidores de la PCR. Luego el ADN es eluido y está listo para ser utilizado en las subsiguientes reacciones.
Dada la gran variedad de muestras que abarcan los alimentos, origen vegetal, origen animal, alimentos procesados,etc, se hace difícil presentar un protocolo universal para todas las muestras. Es por esto que el Departamento Técnico de DANAGEN puede estudiar y ponerle a punto su protocolo específico para su determinado tipo de muestra.
Características:
- Tecnología de membrana de sílica.
- Purificación rápida de un ADN de elevada calidad listo para su uso.
- Pequeñas cantidades de ADN parcialmente degradado puede aislarse a partir de matrices complejas o alimentos procesados.
- Completa eliminación de contaminantes y inhibidores .
- Tamaño de muestra: hasta 200 mg.
Aplicaciones:
- El ADN extraido a partir de muestras fecales es una importante herramienta en diferentes áreas de la investigación genética molecular, desde el diagnóstico del cáncer hasta estudios genéticos de población.
- ADN a partir de matrices complejas, alimentos procesados, soja, chocolate, cereales, comida animal, etc.
- Detección de animales modificados genéticamente.
- Detección de ADN específico en comida de origen animal o vegetal.
DANAGENE SPIN FOOD-STOOL |
|
Ref.0609.1 | 50 extracciones |
Ref.0609.2 | 250 extracciones |
DANAGENE SPIN FOOD-STOOL “Bacterias” Kit
Este kit está optimizado para una eficiente y rápida extracción de ADN bacteriano (Listeria, Salmonella, E.coli, etc) listo para PCR a partir de medios de pre-enriquecimiento o enriquecimiento de diferentes muestras de alimentos o heces utilizando para ello MicroSpin columnas con membranas de fibra de vidrio que unen selectivamente el ADN.
El procedimiento incluye una centrifugación de 1 ml de medio de enriquecimiento para concentrar las células, las células son lisadas durante un periodo de incubación con Solución de Lisis y Lisozima (suministrada con el kit). Después una digestión con Proteinasa K (suministrada con el kit) y limpieza de la mezcla de lisis por centrifugación y unión del ADN a las membranas de fibra de vidrio empaquetadas en MicroSpin columnas. El ADN que se une es purificado mediante varios lavados para eliminar los potenciales inhibidores de la PCR y finalmente el ADN es eluido.
Detección de Salmonella ssp por PCR
Experimentos de amplificación de Salmonella ssp. fueron realizados utilizando el ADN obtenido en extracciones previas. 2 diferentes PCR Mix fueron utilizadas, una de ellas amplifica un fragmento de 285 pb del gen invA de Salmonella (lanes 2 y 5); la otra PCR Mix amplifica el gen invA y un control bacteriano del gen 16S rRNA dando lugar a un fragmento de 1300 pb (lanes 4 y 6).
- Lane 1: control negativo MIX1.
- Lane 3: control negativo MIX2.
Características:
- Tecnología de MicroSpin columnas con membranas de fibra de vidrio.
- Completa eliminación de los inhibidores de la PCR.
- ADN listo para uso en PCR y Real Time PCR.
- Tamaño de la muestra: a partir de 1 ml de medio de enriquecimiento de diferentes muestras de alimentos o heces.
DANAGENE SPIN “FOOD-Bacterias” kit
|
|
Ref. 0605.3 | 50 extracciones Incluye Lisozima y Proteinasa K |
Ref. 0605.4 | 250 extracciones Incluye Lisozima y Proteinasa K, |
FFTE Tissue DNA
DANAGENE FFPE DNA Kit
Este kit está optimizado para ser un método rápido de extracción de ADN a partir tejidos embebidos en parafina y fijados con formalina (FFPE).
El proceso omite el uso de los inflamables y malolientes xileno y d-limoneno comúnmente usado para la desparafinización, en su lugar, se utiliza un TAMPON de DESPARAFINIZACIÓN propio para la completa disolución de la parafina y liberar el tejido.
Características:
- Tecnología de membrane de silica con microcolumnas especiales.
- Bajo volumen de elución:15-30 μl.
- Fácil eliminación de la parafina.
- Método seguro evita tóxicos como el xileno y otros.
- Completa eliminación de conatminantes e inhibidores para las aplicaciones posteriores.
- La calidad del ADN es conveniente para NGS.
Aplicaciones:
- Extracción rápida de ADN a partir de muestras FFPE.
- Extracción de ADN de muestras de FFPE frescas y archivadas.
- Extracción de ADN a partir de especímenes en portaobjetos.
- Típicas aplicaciones posteriores: PCR, PCR cuantitativa, Análisis de STR y NGS.
Procedimiento:
1. Eliminación de la parafina: La parafina es disuelta y eliminada con el TAMPÓN de DESPARAFINIZACIÓN.
2. Lisis: La muestra es lisada bajo condiciones desnaturalizantes con proteinasa K.
3. Calentamiento: Incubación a 90ºC libera los puentes de formalina.
4. Unión: El ADN se une a la membrana y los contaminantes para atravésde la columna.
5. Lavado: Los contaminantes son eliminados con 2 lavados.
6. Elución: El ADN es eluido y concentrado.
DANAGENE FFPE DNA KIT |
|
Ref.0610.1 | 50 extracciones. Incluye la proteinasa K |