DANAGENE Circulating DNA MidiKit

Download Product Sheet       Download Protocol

DANAGENE Circulating DNA MidiKit

DANAGENE Circulating DNA Midikit proporciona un método rápido, seguro y conveniente para purificar y  concentrar ADN circlulante de elevada calidad, pureza y libre de inhibidores a partir de muestras frescas o congeladas de suero/plasma u otros fluidos biológicos de muestras de 3 ml  utilizando para ello 2 columnas y un tampón especial que unen especialmente los fragmentos de menor tamaño característicos de estos fluidos.

Normalmente el ADN circulante se encuentra altamente fragmentado 50-1000 pb. El grado de fragmentación depende de varios parametros como el origen del ADN (fetal, tumor, ADN microbiano), salud del donante de sangre, procedimiento de recolección de la sangre, manejo y almacenamiento de la muestra.

El contenido de ADN circulante depende las condiciones particulares de cada muestra pero típicamente oscila en el rango de 0.1-100 ng / ml plasma/suero.

 Características

  • Para una rápida obtención de ADN circulante a partir de plasma y suero.
  • Tamaño de muestra: 3 ml de  plasma o suero y fluidos biológicos.
  • No se utilizan extracciones orgánicas o precipitaciones con alcohol.
  • Completa eliminación de inhibidores o contaminantes.
  • Típico rendimiento: 0.1-100 ng por ml de plasma/suero. Variable debido a cada donante y estado de la enfermedad.
  • Volumen de elución: 35 ul.
  • Se obtiene un ADN que puede ser utilizado directamente en PCR o real-time PCR.

 Campos de aplicación

  • ADN circulante a partir de plasma o suero.
  • Ideal para la detección de Biomarcadores en diferentes enfermedades.
  • Análisis de ADN fetal a partir del plasma materno.

 

 

Cuantificación del ADN circulante de muestras de plasma

Se recolectaron muestras de sangres de 8 pacientes con cáncer de mama ( muestras 1 a 8). 2 muestras se utilizaron como   controles de pacientes sanos ( muestras 9 y 10) y 2 muestras de individuos sanos al que se añadieron 150 ng (muestra 11) y   300 ng (muestra 12) de ADN genómico humano.

Se aisló el ADN circulante a partir de muestras de 3 ml de   plasma siguiendo el protocolo del DANAGENE Circulating DNA MidiKit y se cuantificó utilizando el Cell-free human DNA  detc-qPCR Test . 

Hemos detectado con éxito incrementos en las concentraciones del ADN circulante en todos los pacientes con cáncer respecto a los individuos sanos tal y como se demuestra en otros estudios.